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小鼠抗雙鏈DNA抗體ELISA試劑盒新一代產品正確的選擇!

發(fā)布時間: 2018-05-14  點擊次數(shù): 2696次

小鼠抗雙鏈DNA抗體ELISA試劑盒新一代產品正確的選擇!

ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結果,使測定方法達到很高的敏感度。

檢測目的
本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中抗雙鏈DNA抗體(dsDNA) 含量。

實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠抗雙鏈DNA抗體(dsDNA) 水平。用純化的小鼠抗雙鏈DNA抗體(dsDNA) 抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入抗雙鏈DNA抗體(dsDNA) ,再與HRP標記的抗雙鏈DNA抗體(dsDNA) 抗 體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的抗雙鏈DNA抗體(dsDNA) 呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標 準曲線計算樣品中小鼠抗雙鏈DNA抗體(dsDNA) 濃度。

ELISA試劑盒實驗操作事項:
1、要確保微量加樣器的準確性,可以使用蒸餾水和電子天平進行確定(由于蒸餾水不含雜質,溫度環(huán)境為20℃左右時,1ml的水可以看作是1g,200ul的水可以看作是0.2g),每一把微量加樣器都應該將其zui高量程和zui低量程進行確定。
2、在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標準品溶液。
3、吸取液體時速度不且太快,以免產生氣泡,吸取的量不夠準確。
4、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭的液體和孔壁接觸,液體會自然流下去。吸入液體時的zuihao方法是吸兩檔打一檔,防止由于槍頭的毛細作使得部分液體不能流出而造成誤差。

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5、吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。
6、液體全部加入酶標孔后,zuihao將酶標板放在桌子上平行輕輕搖晃30s,使液體充分混合均勻,也使其得到充分的反應。

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