脂多糖（來源于大腸桿菌）使用方法

簡(jiǎn)介：脂多糖，英文名稱Lipopolysaccharides，簡(jiǎn)稱LPS，是革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁中的一種*成分，位于細(xì)胞壁的外層并暴露于非莢膜細(xì)菌的細(xì)胞表面，有利于維持細(xì)胞外膜的完整性，保護(hù)細(xì)菌免受膽汁鹽和脂類抗生素的破壞。結(jié)構(gòu)上，脂多糖由類脂A、核心多糖和O-多糖側(cè)鏈組成。其中類脂質(zhì)A是構(gòu)成細(xì)菌內(nèi)毒素的主要成分，決定其毒性強(qiáng)弱；而O-多糖側(cè)鏈在不同細(xì)菌間是高度變化的，特異性決定細(xì)菌的血清型。 

LPS可以引起免疫刺激的級(jí)聯(lián)反應(yīng)和機(jī)體的毒性病理生理活動(dòng)，包括釋放內(nèi)毒素引起感染性休克從而導(dǎo)致末梢血管虛脫。常通過檢測(cè)LPS的存在來診斷腦膜炎。正是LPS與機(jī)體免疫機(jī)能的密切關(guān)系，生命科學(xué)研究常常提取LPS進(jìn)行相關(guān)的研究，如闡明LPS的結(jié)構(gòu)，代謝，免疫學(xué)，生理學(xué)，毒性，生物合成途徑；誘導(dǎo)生長(zhǎng)促進(jìn)因子如白介素的合成與分泌；誘導(dǎo)疾病研究的動(dòng)物模型如炎癥反應(yīng)，急性肺損傷。將LPS分別與FITC、TRITC或2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid (TNBSA)反應(yīng)即可得到FITC、TRITC或TNP標(biāo)記的LPS，主要用于非胸腺依賴性B細(xì)胞對(duì)細(xì)菌LPS的免疫應(yīng)答研究。

使用方法

1.配制儲(chǔ)存液（用于細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)實(shí)驗(yàn)）：將1mg LPS重懸于1mL無菌平衡鹽溶液或細(xì)胞培養(yǎng)基，輕微旋渦振蕩直至粉末*溶解，即得到1mg/ml的儲(chǔ)存液。此儲(chǔ)存液可進(jìn)一步用無菌平衡鹽或細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋至需要的工作濃度。

2.儲(chǔ)存液的保存：本儲(chǔ)存液（1mg/ml）可放在4℃保存，約一個(gè)月穩(wěn)定；也可分裝成單次用量后放到-20℃，2年穩(wěn)定。避免反復(fù)凍融。

配制注意：LPS溶液應(yīng)儲(chǔ)存于硅烷化容器內(nèi)，因?yàn)長(zhǎng)PS可吸附于塑料或某些玻璃器皿，尤其當(dāng)其濃度＜0.1mg/ml時(shí)。但當(dāng)LPS濃度大于1mg/ml時(shí)，上述吸附則可忽略不計(jì)。如使用玻璃器皿，則需旋渦振蕩LPS溶液至少30min，以重溶被吸附溶質(zhì)。

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