蛋白酶K/Proteinase K

蛋白酶K是一種枯草蛋白酶類的高活性蛋白酶，用于生物樣品中蛋白質(zhì)的一般降解。從林伯氏白色念球菌（tritirachium album limber）中純化得到。蛋白酶K是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。此酶經(jīng)純化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中穩(wěn)定，還具有降解天然蛋白質(zhì)的能力。

產(chǎn)品：蛋白酶K

含量：≥20mg/ml 【24mg/ml】

純度：≥95% SDS-PAGE

活性：≥30U/mg 【42U/mg】

DNase：未檢出

RNase：未檢出

CAS號(hào)：39450-01-6

類型：非特異性、枯草桿菌蛋白酶相關(guān)的絲氨酸蛋白酶

分子量：28,900道爾頓（28.9kDa）

物理和化學(xué)性質(zhì)

溶液顏色：無色透明，如出現(xiàn)沉淀則不能再使用

穩(wěn)定性：在尿素和SDS中穩(wěn)定，EDTA等螯合劑或SDS等去垢劑均不能使之失活

活性范圍：在較廣的pH范圍（4～12.5）內(nèi)及高溫（50～70°C）均有活性

作用與功能

DNA提取：蛋白酶K在DNA提取中的主要作用是酶解與核酸結(jié)合的組蛋白，使DNA游離在溶液中，隨后用不同方法進(jìn)行抽提，除去雜質(zhì)，收集DNA。

RNA提取：在RNA提取過程中，蛋白酶K可以抑制RNA酶的活性，降低RNA酶對(duì)RNA的降解作用。

原位雜交技術(shù)：用于雜交前的處理，具有消化包圍靶DNA蛋白質(zhì)的作用，以增加探針與靶核酸結(jié)合的機(jī)會(huì)，提高雜交信號(hào)。但需注意濃度過高、消化時(shí)間過長(zhǎng)或孵育溫度過高時(shí)，會(huì)對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)造成破壞。

病毒滅活：蛋白酶K因其蛋白水解能力可以破壞病毒表面的蛋白，具有作為病毒滅活消毒劑的潛力。

工業(yè)應(yīng)用：在皮革、毛皮、絲綢、醫(yī)藥、食品、釀造等方面有廣泛應(yīng)用，如皮革工業(yè)的脫毛和軟化、蠶絲脫膠、肉類嫩化等。

應(yīng)用注意事項(xiàng)

在使用蛋白酶K時(shí)，應(yīng)注意控制其濃度和處理時(shí)間，以避免對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)造成不必要的破壞。

蛋白酶K具有自我酶解特性，在無保護(hù)劑時(shí)很難長(zhǎng)期穩(wěn)定保存，因此在制備和儲(chǔ)存過程中需要特別注意。