土壤DNA提取試劑盒使用技巧

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適用于各類土壤樣品中核酸的提取。樣本預處理采用陶瓷珠和二氧化硅顆粒混合而成的玻璃珠，可有效處理真細菌孢子和內生孢子，革蘭氏陽性細菌，酵母，藻類，線蟲和真菌等土壤中的各類微生物。離心吸附柱中采用的硅基質材料為本公司*新型材料，配合本公司*的裂解液配方可以可在40 min內大限度的回收高純度核酸。提取的DNA純度高，質量穩定可靠，可適用于各種下游應用實驗，如酶切、PCR等實驗。

運輸與保存方法
室溫運輸，室溫保存，有效期 12 個月。

注意事項
1. 避免試劑長時間暴露于空氣中產生揮發、氧化、pH 值變化，各溶液使用后應及時蓋緊蓋子。
2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
3. 本產品僅作科研用途！
實驗前準備
1. 自備設備和試劑：臺式離心機、振蕩儀、水浴鍋或金屬浴，無水乙醇，離心管等。
2. 所有的離心步驟均在室溫完成，使用可以達到 12,000 rpm 轉速的傳統臺式離心機

DNA 提取：
1. 將 DNA 吸附柱套入 2 mL 收集管中，備用。
2. 將預處理混合液加入到 DNA 吸附柱中，12,000 rpm 室溫離心 1 min，棄掉廢液。
【注】：混合液每次大加入體積 700 μL，可分多次離心。
【注】：離心后，若濾膜仍有液體殘留，可延長離心時間至 5 min。
3. 將 DNA 吸附柱放回收集管，加入 600 µL 漂洗液 W*，12,000 rpm 室溫離心 30 sec，棄廢液。
【注】：確保漂洗液 W*已添加無水乙醇。
4. 重復一遍步驟 3。
5. 將 DNA 吸附柱放回收集管，空柱 12,000 rpm 室溫離心 2 min，以除去殘留的漂洗液 W*。
6. 將 DNA 吸附柱放入新的潔凈 1.5 mL 離心管中，在濾膜中央加入 30-100 µL 洗脫液，室溫放置 3 min。然后 12,000 rpm 離
心 1 min，收集濾液即為樣本 DNA。
【注】：可通過以下方式提高回收產量：①65℃預熱洗脫液；②將濾液再次上柱，室溫放置 3 min，洗脫。
7. 樣品 DNA 可置于-20℃短期保存，-80℃保存。
【注】：過量的 DNA 可能抑制下游 PCR 反應，遇到這種情況建議將 DNA 模板進行稀釋后試用。